發(fā)布時(shí)間 : 2020-06-17 閱讀次數 : 163
做細胞生物學(xué)實(shí)驗,細胞鋪板大概是常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗.但是有很多人不是很得要領(lǐng),鋪得不是很均勻：要么中間密周?chē)?要么周?chē)苤虚g禿頂.怎么辦呢？
細胞懸液加完后,將細胞培養板抬高,對著(zhù)燈光,從底部往上看,看細胞有沒(méi)有抱團.然后從底部敲擊,使之分散.如果實(shí)驗室有平板振蕩器的話(huà),建議用這個(gè)儀器稍振蕩一下,效果不錯,振幅小,頻率高.
一般96孔板,每孔是加100微升細胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細胞懸液混一下再繼續加剩余的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度（我一般輕巧敲三下）,太強或次數太多會(huì )導致細胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉（逆時(shí)針效果不好）,依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入37度培養箱.
6孔板 12孔板或24孔板,均可采用將個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養基,晃動(dòng)浸潤整個(gè)孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔一次類(lèi)推,這樣整個(gè)孔底都是濕潤的,細胞懸液會(huì )平鋪在整個(gè)孔底,加細胞懸液的時(shí)候可以避免加在中間,中間細胞多,而加在周邊晃勻后會(huì )出現周邊細胞多中間少的現象,細胞分散較均勻,注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下.
細胞要盡量打散,大部分呈單個(gè)狀態(tài).離心后,要充分懸浮.還有轉移到六孔板后,需要晃動(dòng),晃的時(shí)候zui好不要讓細胞液轉圈,不然細胞就全被帶到中間去了,就會(huì )不均勻.
一瓶細胞長(cháng)滿(mǎn)后,正常處理,在培養瓶里吹勻,然后鋪6孔板,每孔2毫升,鋪完之后不用觀(guān)察直接用酒精棉擦拭,然后放到培養箱里,輕微的左右前后各三圈.基本上24小時(shí)之后再觀(guān)察,每孔的細胞都會(huì )很均勻.
計算好所需要的全部液體量和細胞量,混勻后,加到六孔板里,六孔板按橫8字型晃,顯微鏡下觀(guān)察,如果不均勻,按上述方法再晃.如果細胞未計數直接種的話(huà),在種六孔板的過(guò)程中,隨時(shí)晃一下混勻用的瓶子.
放在水平板面上先上下移動(dòng),再左右移動(dòng),每個(gè)方向5到6次,但關(guān)鍵的是搖晃后zui好直接放入培養箱中,不要再做過(guò)多的運動(dòng),例如放到鏡下去看,否則很容易就又聚到中間去了.
客服熱線(xiàn) 
客服QQ 
公司郵箱 
售后服務(wù) 
