ELISA試劑盒定量與定性測試您知道多少？【elisa試劑盒】

發(fā)布時(shí)間：2021/6/11 16:23:28 閱讀次數：1737

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ELISA是以免疫學(xué)反應為基礎,將抗原牽9體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗技術(shù).由于抗原抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩定性.在實(shí)際應用中,通過(guò)不同的設計,具體的方法步驟可有多種.即用于檢測抗體的間接法用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等.比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法.

一 ELISA試劑盒定量測試

ELSIA操作步驟復雜,影響反應因素較多,特別是固相載體的包被難達到各個(gè)體之間的一致,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線(xiàn).測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標準曲線(xiàn)的范圍一般較寬,曲線(xiàn)點(diǎn)的吸光度可接近2.0,繪制時(shí)常用半對數紙,以檢測物的濃度為橫坐標,以吸光度為縱坐標,將各濃度的值逐點(diǎn)連接,所得曲線(xiàn)一般呈S形,其頭尾部曲線(xiàn)趨于平坦,中央較呈直線(xiàn)的部分是*理想的檢測區域.

二 ELISA試劑盒定性測試

定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無(wú)"的簡(jiǎn)單回答,分別用"陽(yáng)性" "陰性"表示."陽(yáng)性"表示該標本在該測定系統中有反應."陰性"則為無(wú)反應.用定性判斷法也可得到半定量結果,即用滴度來(lái)表示反應的強度,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗.在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗,呈陽(yáng)性反應的稀釋度即為滴度.根據滴度的高低,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀(guān)察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽(yáng)性弱陽(yáng)性更具定量意義.

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